来源：检验医学网
作者：李上春
指导：朱春玲
单位：广西国际壮医医院
新型冠状病毒属于β属冠状病毒，是一种单链RNA病毒，其基因组易发生突变，而采用多靶标检测方法（如ORF1ab基因、N基因、E基因、S基因），可减少由于基因突变引起的漏检以及交叉反应引起的假阳性。国家卫健委印发《新型冠状病毒肺炎实验室检测技术指南（第七版）》文件中，也推荐选用针对新型冠状病毒的ORF1ab、N基因作为检测双靶标。
然而，在我们平常的检测工作中，经常会遇到用双靶标试剂进行检测而结果却出现单基因“翘尾”（扩增曲线为非典型S型且CT值较高）的情况。遇到这种情况该如何判读结果呢？下面分享一下本人在边境地区大规模新冠核酸检测工作中遇到的一例单基因“翘尾”案例（如图1）。
图1 第一次检测的结果
如图所示，该结果为单基因ORF-1ab“翘尾”，CT值为35.82。当日的所有检测结果均为阴性，只有该样本出现了“翘尾”，所以排除了实验室污染的情况。且该孔也不在阳性质控孔的附近，推测阳性质控污染的可能性也不大。
本次检测使用A、B两个品牌的扩增试剂，根据试剂说明书要求，结果出现CT值<40的情况需对标本进行复查。为了避免出现假阴性或者假阳性，我们使用了双试剂对该标本进行复查，同时也将第一次提取的核酸重新点样检测，结果如图2至图7。
注：图2、3、4所用扩增试剂为A品牌扩增试剂
注：图5、6、7所用扩增试剂为B拼配扩增试剂
复查结果显示：第二次提取的核酸，用A品牌扩增试剂检测仍然存在ORF-1ab“翘尾”的情况，用B品牌扩增试剂检测结果都是阴性；用第一次提取的核酸重新点样检测，A品牌扩增试剂检测结果为阴性，B品牌扩增试剂检测结果则出现了N基因“翘尾”，结果之间存在不一致性。那为什么会出现这种情况呢？
为了防止出现漏检的情况，结合《新型冠状病毒肺炎实验室检测技术指南（第七版）》文件中的阳性判断标准，需要重新采集样本并用灵敏度更高的试剂进行检测。
因此，我们联系了当地疫情防控指挥部，后经查实该病人之前是新型冠状病毒肺炎确诊病例，经过隔离治疗之后，符合国家卫生健康委发布的新型冠状病毒肺炎诊疗方案（试行第九版）出院及解除隔离的标准，已经解除隔离了。
了解完该病人的情况后，我查阅了相关的资料：其中提到，出院患者的病毒核酸检测再次阳性，其检测到的未必是活病毒，也可能是病毒的基因片段，迄今为止尚未在“复阳”患者的标本中分离培养出活病毒，且有研究显示目前未发现复阳患者周围人群感染情况。
结合这些资料进行分析，该病人体内可能有新冠病毒基因片段残留，且病毒载量少，不易检出，而不同新冠病毒核酸检测试剂包含有不同靶标基因位点，检测敏感性、特异性不同，试剂中酶、金属离子等成分质量差异也会影响检测结果，导致复查结果存在一些差异性。
在当前疫情严峻的情况下，实验室对于新冠核酸检测阴阳性的判断应慎重，遇到单基因“翘尾”时，应当结合试剂说明书来判读结果，或进行复查，进一步降低假阴性率，快速准确地出具新冠病毒核酸检测结果，保障目前疫情防控。
【参考文献】
[1]《新型冠状病毒肺炎实验室检测技术指南（第五版）》
[2] 国家卫生健康委.新型冠状病毒肺炎诊疗方案（试行第九版）
[3] 国家卫生健康委.新型冠状病毒肺炎防控方案（第九版）
[4] 冯春森，裴家强，陈燕红，熊智勇，黄广涛，曹国强，游波 新型冠状病毒肺炎复阳患者的临床特点、预后及传染性［J］重庆医学，2021,50（6）：945-948
[5] 张文佳,廖璞.1 例新型冠状病毒肺炎多次核酸检测异同结果的原因分析[J].重庆医学,2020,49(17):2834-2836.
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