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题目:PEDV 免疫 反应不能预防同源毒株在5个月后的再次感染

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摘要:本研究旨在评价猪流行性腹泻 病毒 (PEDV)的免疫保持持续时间。为此,进行了一项两阶段研究。第一阶段,75头4周龄猪只(A组)口服接种(接种后0d),5个月后开始第二阶段(接种后154d),A组为同源攻毒,B组为首次攻毒。每次接种后评估临床体征、排毒情况和免疫反应,包括 抗体 (ELISA和病毒中和试验,酶联免疫斑点实验(ELI-SPOT)检测外周血单核 细胞 和淋巴结细胞中的IgA和IgG抗体)、干扰素-γ(IFN-γ)分泌细胞频率的测定。在第一阶段,所有A组猪只均出现浆糊样粪便/水样粪便。PEDV排毒主要发生在前14天,但在一些猪只中持续到攻毒后42d。所有接种猪只血清转化为PEDV 特异性 IgG和IgA,以及中和抗体(NA)。在接种后154d时,77%的猪只仍呈NA阳性。在此之后,同源攻毒激发了IgG、IgA、NA以及特异性PEDV IgG、IgA和IFN-γ分泌细胞。尽管如此,在A组所有猪只的粪便中均检测到PEDV,表明免疫反应并不能防止再次感染,尽管排毒时间和病毒排毒总载量在之前攻毒的猪只中明显较低(p<0.05)。综上所述,以上这些结果表明,PEDV在猪场的持续感染可能通过传播给或从以前受感染的猪只而发生,也表明消除性免疫比猪只的生产寿命短。

1:实验设计

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注释:

1ST PHASE:第一阶段

0 Days post-infection (dpi) (4 weeks of age):感染后0天(dpi)(4周龄)

2ND PHASE:第二阶段

154 dpi (+0) (24 weeks of age):感染后154天(dpi)(24周龄)

Serum sample(VNT):血清样本(VNT:病毒中和试验)

Heparin tubes(PBMC):肝素管(PBMC:外周血单核细胞)

Euthanized(LC):安乐死(LC:肠系膜淋巴结单核细胞)

G1b PEDV inoculation:G1b型PEDV接种

Mock-inoculation:不接种

Clinical follow-up:临床随访

Viral detection:病毒检测

Specific-PEDV IgG and IgA:特异性PEDV IgG和IgA抗体

homologous inoculation:同源接种

图1:临床评分。在A组猪只感染后0d(第一阶段),感染后154d同源攻毒(第二阶段)。

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注释:days post-infection:感染后天数

Liquid faeces:水样粪便

Semi-liquid faeces:浆糊样粪便

Soft/Loose stools:软/松样粪便

图2:粪便中PEDV的检测

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注释:days post-infection:感染后天数

GROUP A (inoculation at 4 weeks of age):A组(四周龄时接种)

% pos GROUP A (inoculation at 4 weeks of age):A组阳性率(四周龄时接种)

图3:ELISA检测PEDV特异性IgG抗体

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注释:days post-infection:感染后天数

图4:ELISA检测PEDV特异性IgA抗体

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注释:days post-infection:感染后天数

图5:病毒中和试验

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注释:days post-infection:感染后天数

图6:IgG和IgA酶联免疫斑点实验(ELISPOT)

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表2:PBMC和LC中PEDV特异性IgG、IgA和IFN-γ-SC频率的相关性

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注释:

PBMC:外周血单核细胞

LC:肠系膜淋巴结单核细胞